油红o染色（油红o染色测OD值原理）
本文目录一览：
- 1、油红o染色后怎么看含脂滴的肝脏细胞
- 2、请教油红O给细胞染色的详细步骤
- 3、油红-o染色的技术和步骤
- 4、细胞的油红o染色 75%洗多久合适
油红o染色后怎么看含脂滴的肝脏细胞
1、10%中性甲醛的配制
材料：中性甲醛(多聚甲醛)
密封瓶
称取1g中性甲醛粉末，加入10ml的三蒸水中，密封，在60度水浴中过夜才能溶解。配好的溶液1个星期内有效，最好4度保存。
2、染色液的配制
材料：油红染料
棕色可密封瓶
异丙醇
研钵
漏斗
定性滤纸
称取预先研磨粉碎的0.5g油红干粉，溶于少量异丙醇中，然后加异丙醇至100ml，棕色瓶密封(或锡箔纸包裹避光)4℃保存，为储存液，可长期保存。用时取6ml加三蒸水4ml混匀，定性滤纸过滤，稀释后数小时内用完。
3、培养载体
3毫升培养瓶。如果培养载体为塑料制品，hoechst33342染核的话，塑料板自发荧光也为蓝色，必须考虑。
4、.染色对象
间充质细胞脂肪诱导后不同时间段。
5、注意事项：
脂肪油红染色，有的是动物/人体脂肪组织切片，或细胞爬片。各有操作差异。以下是各论坛方法小结，不全。
(1).完全成熟饱满的脂肪细胞，容易破裂，脂滴泄漏，所以压片，切片都要考虑到这个问题。
(2).细胞爬片细胞溶液脱落，特别是脂滴大的。操作务要轻柔。不要把细胞冲掉。
(3).如果做脂肪组织冰冻切片，冰冻温度比普通要低，切片厚度加厚。
6、染色步骤：
(1)
先小心轻缓倒去培养夜。
(2)
用pbs轻缓漂洗(不洗没问题)。
(3)加10%中性甲醛固定30min(实际固定时间过夜都没问题。固定液用95%酒精也可)。固定的是细胞膜。
(4)
稀释油红储存液，油红：去离子水＝3:2，滤纸过滤，室温放置10min(除去一些杂质，染色结果更清晰)。
(5)染色10min左右，加的体积覆盖住板底即可，如6孔加1.5ml，24孔加0.5-1ml(实际染色时间1小时都可以)。
(6)脱色，用75%酒精/60%异丙醇漂洗，除去多余的染料(实际用其他平衡液洗也没问题，背景并不会残留多少)。
(7)
复染，淡苏木染色1/5分钟，pbs漂洗(这一步不做也可，看试验需要，并且苏木素会把胞浆染红，如要显示核，
hoechst33342也可以，浓度5微克/毫升染10分钟即可把核染上)。
(8)甘油明胶封片(封片后可长期保存)。
(9)显微镜观察。
请教油红O给细胞染色的详细步骤
油红O染色液主要由油红O异丙醇饱和液组成，利用染料易溶于脂质的性质证明组织脂质含量的多少。适用于细胞学与组织学研究的切片观察.但渗透慢,不能长期保存;冰冻切片附贴于载玻片后，立即放入恒冷箱中的固定液固定1分钟后即可染色。?染色后脂滴呈橘红色。下面来了解一下油红O染色步骤有哪些。
油红O染色步骤
试剂:
0.5%的油红O溶液
配方(100ml)： 油 红O ： 1.5g
70%乙醇 ： 50ml
丙酮 ： 50ml
需要的其他试剂：异丙醇、乙醇、丙酮、苏木素（hematoxylin）
染色步骤:
1．将冰冻切片(厚度为4-8um)常温干燥15-20min.
2．100%异丙醇孵育5分钟（避免把水带入油红O）。
3．0.5%的油红O溶液孵育7-8分钟（在60 oC烤箱）
4．85%异丙醇溶液洗3分钟
5．双脱水洗。
6．苏木素染1-1.5min。
7．双脱水洗。
8．封片剂封片
结果: 脂质呈红色或者橘黄色
细胞核呈淡蓝色
油红O染色步骤注意事项：
1 由于脂肪易溶于有机溶剂，所以一般用冰冻切片染色来显示。
2 作脂肪染色的冰冻切片不能太薄，过薄的切片常会使脂质丢失。
3 苏木素复染时间不能过长。
4 染色结果不能长期保存，应尽快观察。
以上便是油红O染色步骤，油红O染色常用作染脂肪。脂类染色法最常用以证明脂肪变性，脂肪栓子以及肿瘤的鉴别。脂类染色使用最广泛的染料是苏丹染料，最常用的有苏丹Ⅲ，苏丹Ⅳ，苏丹黑及油红O等。脂肪被染色，实际上是苏丹染料被脂肪溶解吸附而呈现染料的颜色。脂类染色，用冰冻或石蜡切片，以水溶性封固剂封固，如甘油明胶和阿拉伯糖胶等。
油红-o染色的技术和步骤
试剂配制：
油红O 0.5g
异丙醇（含量98%） 100ml
此为油红饱和液，可长期保存备用。
染色步骤：
(1)冻切片
(2)蒸馏水充分洗涤。
(3)油红稀释液染10-15分钟，避光、密封。油红稀释液的配制：
(4)取油红饱和液6毫升，加蒸馏水4毫升，静置5-10分钟后过滤后使用。
(5)60%乙醇镜下分化至间质清晰。
(6)水洗。
(7)Marry氏苏木素复染核。
(8)水洗。
(9)甘油或甘油明胶封片。
结果：脂肪呈鲜红色，细胞核呈蓝色，间质无色。
注意事项：
1. 油红染色时应避免试剂挥发过多，否则易形成背景沉淀。
2. 60%乙醇分化，应于镜下控制至脂肪组织呈鲜红色，间质无色时为度。
细胞的油红o染色 75%洗多久合适
一般染色10-15min，细胞的话时间可以短一些，切片可以长一些，具体的要根据细胞的类型，切片的厚度等进行调整。
油红o生物染色剂,淀粉凝胶电泳中作类脂和脂蛋白染色。显微技术中用作脂肪染色剂。油红 是一种油溶性偶氮染料。易溶于苯，溶于乙醇(呈浅黄色红色)和丙酮。在浓硫酸中呈浅蓝绿色，稀释时产生蓝紫色沉淀。